Skip to content

radom szpital na tochtermana ad 5

2 miesiące ago

492 words

Liczba infuzji komórek różniła się szybkością wzrostu komórek i całkowitym czasem w hodowli, a także ponieważ niektóre komórki zostały utracone z powodu zanieczyszczenia lub zastosowania w badaniach eksperymentalnych. Od 3,3 do 14,5 x 1010 komórek z hodowli transdukowanych genami podano pięciu pacjentom. Na podstawie półilościowych oznaczeń reakcji łańcuchowej polimerazy, szacowany procent transdukowanych komórek w tych hodowlach wynosił od do 11 procent. Szacunki te były podobne do tych uzyskanych w wyniku ilościowej analizy Southern blot (od 4 do 18 procent). Ryc. 1. Ryc. 1. Wzrost i selekcja ludzkiej TIL. Panel po lewej pokazuje wzrost TIL od Pacjenta 5 w hodowli. W dniach 8 i 9, połowę hodowli TIL transdukowano wektorem LNL6 i hodowano równolegle z pozostałymi komórkami. Komórki z obu hodowli podano pacjentowi w infuzji 30 dnia 30. Półokresowa reakcja łańcuchowa polimerazy ujawniła, że około 10 procent transdukowanych komórek zawierało gen NeoR. Panele po prawej pokazują wyniki ekspozycji na porcje transdukowanych i niepoddanych transdukcji komórek w czasie infuzji komórek do różnych stężeń G418. Liczby w każdej linii reprezentują stężenia G418 w miligramach na mililitr. Jedynie transdukowane komórki przeżyły ekspozycję na 0,4 i 0,5 mg G418 na mililitr.
Przykład (przy użyciu TIL od pacjenta 5) szybkości wzrostu transdukowanej genu i nietransdukowanej TIL pokazano na Figurze 1. W dniach 8 i 9, połowę komórek transdukowano wektorem LNL6. Transdukowane i nietransdukowane populacje komórek rosły w przybliżeniu w równych proporcjach przez 30 dni, a następnie były infuzowane. Komórki nietransdukowane i transdukowane genami miały czas podwojenia odpowiednio 2,0 i 2,3 dni.
Badania transfekowanego genetycznie i nietransdukowanego TIL
Tabela 3. Tabela 3. Fenotyp i cytotoksyczność komórek infuzyjnych. Badania ekspresji 11 determinant powierzchni komórki i cytotoksyczności transdukowanych genów i nietransdukowanych kultur mierzonych w ciągu jednego tygodnia dnia infuzji są przedstawione w Tabeli 3. Większość wszystkich komórek to limfocyty T CD3 + CD8 +, chociaż w niektórych hodowlach istniało do 20% komórek CD3 + CD4 +, a na ogół populacje transdukowane genami i nietransdukowane miały podobny odsetek komórek CD4 + i CD8 +. Najwięcej zmian zaobserwowano w komórkach od Pacjenta 4; 55 procent populacji nieprzetransdukowanych komórek było CD8 +, w porównaniu z 94 procentami populacji transdukowanych komórek. Występowały różnice w cytotoksyczności przeciwko różnym celom pomiędzy transdukowanym i nietransdukowanym TIL, a także wrażliwym na K562 wrażliwym na zabójca (NK) i niewrażliwymi na NK liniami komórkowymi Daudi, jak można się było spodziewać w hodowlach hodowanych niezależnie przez wiele tygodni.
Figura 2. Figura 2. Test Southern Blot DNA wektora LNL6 w transdukowanym (T) i nietransdukowanym (N) TIL. Enzym restrykcyjny SstI przecina każdą z długich końcowych powtórzeń wstawionego prowirusowego DNA raz, wycinając fragment o wielkości 3,05 kb. Transdukowane TIL selekcjonowano przez hodowlę w pożywce zawierającej G418 od wszystkich pacjentów z wyjątkiem Pacjenta 2. Wszystkie transdukowane hodowle i żadna z nietransdukowanych hodowli zawierała gen NeoR.
Dowód na wstawienie genu NeoR w każdej z hodowli transdukowanych komórek został wykazany w testach Southern blot (ryc.
[hasła pokrewne: witamina b17 wikipedia, przepuklina pępkowa u niemowląt, wyprysk pieniążkowaty ]

0 thoughts on “radom szpital na tochtermana ad 5”